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完整的Western實驗過程比較長,經常會出現沒有結果,或者是顯色后背景高了,背景高,目的蛋白顏色對比不明顯,要么看不清,圖片展示不理想,更別說進行數據分析了。顯色背景高的原因有很多:封閉問題,洗脫問題,一抗二抗問題等。其中最xian著的就是封閉問題。最常見的封閉就是脫脂奶粉和牛血清白蛋白(BSA),當然還有血清,魚皮明膠,聚乙烯吡咯烷酮,封閉液。我們到底應該選擇哪種封閉液?怎么選擇呢?讓我們一起來看看不同的封閉液的優缺點吧!一、脫脂奶粉最pian宜而且最好買的封閉劑就屬脫脂...
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核酸作為一切分子生物學研究的基礎,其提取通常是開啟生物學研究的第一步,而且提取的核酸質量高低也是決定下游實驗成敗的關鍵因素之一。常見的核酸提取方法有酚氯仿抽提法、高鹽沉淀法、柱式法和磁珠法,其中,磁珠法核酸提取都分為哪幾個步驟?讓我們一起來看看吧!第一步:裂解核酸必須從細胞或其他生物物質中釋放出來,細胞裂解可通過機械作用、化學作用、酶作用等方法實現。其中,酶作用主要是通過加入溶菌酶或蛋白酶(蛋白酶K、植物蛋白酶或鏈霉蛋白酶)以使細胞破裂,核酸釋放。蛋白酶還能降解與核酸結合的蛋...
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自1973年世界di一臺商用流式細胞儀問世以來,經過近50年的發展流式細胞儀在結構上發生了一系列的演變:由簡單到復雜、由單激光到多激光、由單色到多色、由分析到分選、從傳統流式到質譜流式&光譜流式等。流式細胞儀分為哪些類別?讓我來帶你了解了解!1.分析型流式細胞儀用于快速分析檢測細胞組分及顆粒懸液,通過同時檢測分析液流中細胞上多種信號,對細胞加以細致的區分鑒別,目前臨床檢驗和科學研究主要使用此類流式細胞儀。2.分選型流式細胞儀用于快速分離獲取目的細胞,在分析檢測基礎上,通過分選...
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流式細胞術(FCM)是一種對處在快速流動中的細胞或其它生物微粒逐個進行多參數的快速定量分析和分選的技術。它集計算機技術、激光技術、流體力學、熒光標記技術、單克隆抗體技術、細胞免疫學于一體,按照細胞或生物顆粒的物理或化學性質,同時具有分析和分選細胞或生物顆粒的功能。流式細胞術在科研方面有哪些應用?讓我們一起來看看吧!一、細胞凋亡檢測在正常細胞中,細胞膜上的磷脂酰絲氨酸(PS)位于胞漿側。細胞凋亡中期,PS外翻。AnnexinV是一種Ca2+依賴的對PS具有高度親和力的磷脂結合蛋...
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由于體外培養的細胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,一般在細胞受到污染早期或污染較輕時,能及時處理并除去污染物,部分細胞還有可能得到挽救。通常情況下,會有哪些微生物會污染培養的細胞?一、霉菌污染污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數在培養液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發現,短期內培養液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細胞之間有縱橫交錯穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養液中。很多菌絲...
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